GFP為什么在紫外線下會發(fā)光？
GFP又名 wtGFP， avGFP， gfp10， 綠色熒光蛋白
GFP綠色熒光蛋白是一種基本的（構(gòu)成熒光的）長斯托克斯位移熒光蛋白，發(fā)表于1992年，來源于Aequorea victoria。它對酸的敏感性低。GFP激發(fā)光的波長是395nm，mEGFP發(fā)射光的波長是509nm。
從上圖的GFP的激發(fā)光譜圖可以看出，紫外線是能夠激發(fā)GFP發(fā)出綠色的熒光。
下圖為用LUYOR-3410高強(qiáng)度紫外線燈觀察GFP的熒光表達(dá)效果：
紫外線燈照射下觀察煙草葉片上的GFP綠色熒光
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為什么大家都選擇高強(qiáng)度紫外燈LUYOR-3410觀察GFP？
高強(qiáng)度紫外燈LUYOR-3410采用的是大功率紫外線led模組，25cm輸出紫外線強(qiáng)度能夠達(dá)到10mW/cm2，能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮熒光，LUYOR-3410照射面積大，適用觀察葉片、植株、小鼠等，LUYOR-3410紫外燈輕巧便攜，無需預(yù)熱，即開即用，目前，在中國農(nóng)科院、華中農(nóng)大、南京農(nóng)大、南京林業(yè)大學(xué)、西南大學(xué)等科研院所得到了廣泛應(yīng)用。
純化的GFP溶液在典型的室內(nèi)燈光下看起來是黃色的，但是當(dāng)在戶外陽光下照射時，它們會發(fā)出明亮的綠色。蛋白質(zhì)吸收來自陽光的紫外線，然后將其作為低能量的綠光發(fā)射。以下是人們在各種搜索引擎中提出的一些相關(guān)問題。
為什么GFP會發(fā)出熒光？
野生型GFP（wtGFP）維多利亞，當(dāng)aequorin與Ca2 +離子相互作用時發(fā)生GFP熒光，誘導(dǎo)藍(lán)色光芒。其中一些發(fā)光能量被轉(zhuǎn)移到GFP，將整體顏色向綠色移動。
熒光蛋白如何發(fā)光？
該蛋白質(zhì)含有238個氨基酸，其中三個（數(shù)字65至67）形成一個發(fā)出可見綠色熒光燈的結(jié)構(gòu)。...在水母中，GFP與另一種稱為aequorin的蛋白質(zhì)相互作用，當(dāng)與鈣一起添加時會發(fā)出藍(lán)光。
GFP 對光敏感嗎？
GFP對酸敏感質(zhì)子化狀態(tài)，然而，在488nm處不吸收光。
GFP吸收什么波長？
GFP在395nm處吸收藍(lán)光，在475nm處具有較小的峰值，并在508nm處發(fā)射綠光，量子產(chǎn)率為0.72-0.85（12，13）。
為什么來自水母的發(fā)光基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中起作用？
這些老鼠之所以發(fā)光，是因為科學(xué)家將某些生物發(fā)光水母中發(fā)現(xiàn)的基因插入到它們的DNA中。該基因是一種蛋白質(zhì)的配方，當(dāng)被藍(lán)色或紫外線擊中時會發(fā)出綠色。...結(jié)果，他們的皮膚，眼睛和器官發(fā)出詭異的光芒。
熒光標(biāo)記物如何工作？
熒光標(biāo)記物具有在其生物環(huán)境中研究蛋白質(zhì)的能力。當(dāng)一定波長的光被引導(dǎo)到分子的發(fā)色團(tuán)時，光子被吸收并將電子激發(fā)到更高的能量狀態(tài)。...多種熒光標(biāo)記可用于染色細(xì)胞的不同部分。
為什么熒光蛋白很重要？
光激活熒光蛋白能夠在空間和時間上跟蹤光標(biāo)記的分子和細(xì)胞，也可用于超分辨率成像?；蚓幋a的傳感器可以監(jiān)測酶的活性和各種分析物的濃度。
熒光是如何工作的？
熒光，發(fā)射電磁輻射，通常是可見光，由材料中原子的激發(fā)引起，然后幾乎立即重新發(fā)射（在大約10-8秒內(nèi)）。初始激發(fā)通常是由入射輻射或粒子（如X射線或電子）的能量吸收引起的。
為什么GFP如此穩(wěn)定？
GFP是238個氨基酸的單鏈多肽（12）。這些氨基酸中的大多數(shù)形成?片，通過反平行結(jié)構(gòu)壓實形成桶。...緊湊的結(jié)構(gòu)使GFP在各種條件下都非常穩(wěn)定，包括用蛋白酶處理（1）。
什么是 GFP 表達(dá)？
綠色熒光蛋白（GFP）已被用作基因表達(dá)的報告分子，因為它在藍(lán)光激發(fā)后發(fā)出綠色熒光。...48小時后，從上清液中收獲載體顆粒并施加到靶細(xì)胞上，然后對其進(jìn)行基因表達(dá)分析。
GFP 標(biāo)記是如何完成的？
GFP標(biāo)記是一種通過使用GFP作為熒光蛋白報告器來制備用于熒光顯微鏡的樣品的方法。這是通過將GFP與靶蛋白在氨基酸鏈的N或C末端克隆來完成的。
GFP是否被紫外光激發(fā)？
野生型GFP有兩個激發(fā)峰：一個主要在395nm處，一個次要在475nm處。如果 GFP 在 395nm （紫外光）處被激發(fā)，它將在為508nm 處發(fā)射綠光。475nm處的激勵值為503nm。S65T突變導(dǎo)致發(fā)色團(tuán)電離。
GFP在固定后會發(fā)出熒光嗎？
作者能夠檢測熒光，然后使用10nm金標(biāo)記的二抗通過電子顯微鏡觀察切片。在這種情況下，GFP熒光在4%多聚甲醛和0.1%戊二醛中存活下來，并且可以通過熒光顯微鏡直接可視化。
綠色熒光蛋白吸收了什么波長的光，發(fā)射了什么波長的光？
來自維多利亞水母的綠色熒光蛋白（GFP）在用長波長紫外線（UV）或藍(lán)光（zui大400nm，475nm處有次級峰）激發(fā)時發(fā)出綠光（λmax = 509 nm）[1]。
RFP 在紫外線下會發(fā)光嗎？
綠色熒光蛋白。...純化的GFP溶液在典型的室內(nèi)燈光下看起來是黃色的，但是當(dāng)在戶外陽光下服用時，它們會發(fā)出明亮的綠色。蛋白質(zhì)吸收來自陽光的紫外線，然后將其作為低能量的綠光發(fā)射。
為什么熒光對水母很重要？
該蛋白質(zhì)在北美水母Aequorea victoria中自然表達(dá)，并通過吸收環(huán)境中藍(lán)光的能量并相應(yīng)地發(fā)出綠色光芒來起作用?？茖W(xué)家們不知道為什么這些水母進(jìn)化出它們的光芒，但有一種假設(shè)是，它可以幫助它們抵御捕食者。
GFP基因會發(fā)光嗎？
綠色熒光蛋白（GFP）是由維多利亞水母產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，在可見光譜的綠色區(qū)域發(fā)出生物發(fā)光。...秀麗隱桿線蟲，并開創(chuàng)了一個GFP將被用作細(xì)胞生物學(xué)發(fā)光標(biāo)志物的時代。
為什么維多利亞Aequorea會發(fā)光？
維多利亞水母的生物發(fā)光是由于綠色熒光蛋白（GFP）和稱為aequorin的化學(xué)發(fā)光蛋白的存在。...這種蛋白質(zhì)在與鈣結(jié)合時會發(fā)光，而不需要照明來激發(fā)。
轉(zhuǎn)基因水果的主要用途是什么？
傳統(tǒng)的作物改良方法往往收效有限，因為倍體水平不同，遺傳變異性有限，生育率低。因此，遺傳轉(zhuǎn)化為商業(yè)品種的改良提供了巨大的潛力。
水晶水母如何發(fā)光？
有時，水晶果凍會在鈴鐺的邊緣周圍發(fā)出綠色的光芒。這是由一種稱為aequorin的光蛋白引起的，它發(fā)出藍(lán)光（稱為生物發(fā)光），以及一種稱為綠色熒光蛋白（GFP）的輔助蛋白，它發(fā)出綠光。
熒光標(biāo)記物在黑暗中會發(fā)光嗎？
熒光標(biāo)記，例如我們的熒光醇基涂料標(biāo)記和熒光水性涂料標(biāo)記，因為它們能夠反射紫外線或紫外線，因此在黑暗中會發(fā)光。專門發(fā)射紫外線的燈（也稱為黑光）不發(fā)出人眼可見的光。
為什么熒光燈會發(fā)光？
您看到的額外光芒稱為紫外線（UV）光。熒光顏色是紫外線反應(yīng)性的，并將光轉(zhuǎn)換為主波長或顏色。...磷光顏料將光源儲存為能量，并在燈關(guān)閉后繼續(xù)發(fā)出光芒。
什么是熒光標(biāo)志物？
熒光標(biāo)記物是特定的分子，如蛋白質(zhì)，它們是共價結(jié)合的熒光團(tuán)，選擇性地結(jié)合到靶標(biāo)的功能團(tuán)上進(jìn)行檢測。zui常用的熒光分子是抗體。
蛋白質(zhì)熒光是如何工作的？
當(dāng)樣品吸收特定波長的光并發(fā)射不同波長的光時，就會發(fā)生熒光。在大多數(shù)情況下，例如蛋白質(zhì)，發(fā)射的光波長比吸收的光長。
黃色熒光蛋白有什么作用？
它們降低了氯化物的敏感性，更快的成熟和更高的亮度（定義為消光系數(shù)和量子產(chǎn)率的乘積）。通常，YFP作為遺傳編碼的FRET傳感器的受體，其中zui有可能的供體FP是單體青色熒光蛋白（mCFP）。
什么是紫外熒光？
熒光是一些寶石暴露在看不見的紫外線 （UV） 下時發(fā)出的可見光。在天然鉆石中，藍(lán)色是zui常見的熒光顏色，但其他顏色可能可見。
紫外線下有什么熒光？
熒光礦物和寶石 在黑光下發(fā)光 熒光巖石包括螢石、方解石、石膏、紅寶石、滑石、蛋白石、瑪瑙、石英和琥珀。礦物和寶石由于雜質(zhì)的存在而zui常被制成熒光或磷光。
GFP在什么溫度下變性？
當(dāng)GFP在高于70°C，5，6 pH極端溫度或氯化胍的溫度下變性時會失去熒光。它只有在變性時才會部分恢復(fù)其熒光。評價了分離和提取的重組GFP的熱穩(wěn)定性。
BFP與GFP有何不同？
與pH 8.5和7.5下對SDS誘導(dǎo)的變性非常耐受的GFP不同，BFP在pH 8.5時容易失去約20%的熒光，在pH 7.5時容易失去約60%的熒光。
GFP的穩(wěn)定性如何？
接觸10分鐘后，GFP在磷酸鹽緩沖溶液（pH 7）中表現(xiàn)出zui大的穩(wěn)定性，有效氯的范圍為20-100 ppm，相當(dāng)于氯化WFI溶液中的40-70 ppm范圍（pH 11（0.23），磷酸鹽緩沖液中的10-50 ppm范圍（pH 6.86（0.21）。
GFP記者如何運作？
綠色熒光蛋白（GFP）使表達(dá)它的細(xì)胞在紫外線下發(fā)出綠色。需要專門的顯微鏡來觀察單個細(xì)胞。黃色和紅色版本也可用，允許同時研究多個基因。它通常用于測量基因表達(dá)。
如何檢測 GFP 表達(dá)？
GFP表達(dá)可以通過熒光顯微鏡、熒光活化細(xì)胞分選（FACS）分析或轉(zhuǎn)染后24-72小時熒光計測定來檢測，具體取決于所使用的宿主細(xì)胞系。有一份已發(fā)表的哺乳動物細(xì)胞系表達(dá)GFP的穩(wěn)定報告（48）。
為什么GFP在基因工程工作中很重要？
編碼綠色熒光蛋白（GFP）的基因zui近已成為真核生物中基因表達(dá)的重要視覺標(biāo)記，因為它比其他報告基因更敏感，不需要特殊的輔助因子進(jìn)行檢測（7），并且可以用光譜熒光計進(jìn)行定量（24）。
什么是GFP質(zhì)粒？
pGLO質(zhì)粒是一種工程質(zhì)粒，用于生物技術(shù)，作為制造轉(zhuǎn)基因生物的載體。質(zhì)粒包含幾個報告基因，zui著名的是綠色熒光蛋白（GFP）和氨芐西林抗性基因。GFP是從水母魚Aequorea victoria中分離出來的。
如何測量GFP熒光？
流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡是檢測GFP信號的兩種常規(guī)工具;流式細(xì)胞術(shù)是一種有效且靈敏的技術(shù)，用于定量分析熒光強(qiáng)度，而熒光顯微鏡可以可視化GFP的亞細(xì)胞位置和表達(dá)。
GFP和EGFP有什么區(qū)別？
GFP和EGFP之間的主要區(qū)別在于，GFP是一種摻入非哺乳動物細(xì)胞分子克隆中的野生型蛋白質(zhì)，而EGFP是一種改進(jìn)或工程化的GFP類型，可用于哺乳動物細(xì)胞。
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