激發(fā)光源的作用:
激發(fā)光源能夠根據(jù)客戶需求發(fā)出單一波長來激發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。那么什么是熒光?當(dāng)某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進(jìn)入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);很多熒光物質(zhì)一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質(zhì)的出射光就被稱之為熒光。
激發(fā)光源有哪些?
激發(fā)光源按照結(jié)構(gòu)來分,分為便攜式熒光激發(fā)光源、臺式熒光激發(fā)光源、熒光顯微鏡激發(fā)光源。
便攜式熒光激發(fā)光源代表型號是美國路陽LUYOR-3415RG,這款能夠選擇5種波長,適合激發(fā)實(shí)驗(yàn)室常用的熒光物質(zhì)發(fā)光。此款市場占有率達(dá)到90%以上份額。臺式激發(fā)光源代表型號是美國路陽LUYOR-3420,這款臺式激發(fā)光源滿足市場上大多數(shù)體視顯微鏡,能夠讓普通體視顯微鏡秒變熒光體視顯微鏡。上海峰志儀器有限公司代理銷售美國路陽生產(chǎn)的各種激發(fā)光源。
激發(fā)光源照射礦石發(fā)出熒光
熒光顯微鏡分析中常用激發(fā)光源的種類
在熒光分析中常用汞燈作激發(fā)光源,根據(jù)汞蒸氣壓的不同可分為:
低壓汞燈
汞蒸氣,可發(fā)射出很強(qiáng)波長的射線,壽命很長,可長時(shí)間連續(xù)工作,射線對眼睛有害,不眼睛時(shí)不可長時(shí)間注視。
高壓汞燈
高壓汞燈又叫高強(qiáng)度紫外線燈,汞蒸氣為1-數(shù)個(gè)大氣壓,可見炮區(qū)的譜線增強(qiáng),在紫外光區(qū),波長為365nm的光線zui強(qiáng)。
中壓汞燈
可以發(fā)射一系列汞線組成的不連續(xù)光譜,除254nm波長以外,多數(shù)譜線都可作為校正波長使用。此外,還有超高壓汞燈、汞-氙燈、汞-鋅燈等。
氫灑和氘燈
是燈泡中加氫蒸氣,經(jīng)閉合放電產(chǎn)生160-350nm波長的光,氫朋激發(fā)態(tài)返回的基態(tài)時(shí),就發(fā)射了氫的連續(xù)光譜,在160nm以下為線樂譜,氫燈和氘燈性能相同,其壽命也比氫燈長,因玻璃吸收紫外
線,故燈殼要用石英制作,或在燈泡出光處開一石英窗,此光源適用于紫外光區(qū)的測定。
氙燈
光的輻射能強(qiáng)度很高,它可在220-1100nm之間發(fā)射很強(qiáng)的連續(xù)光譜,可用于紫外區(qū),可見光及近紅外區(qū)的測定,雖其輻射范圍廣,使用中在生產(chǎn)高熱的同晨有臭氧味,其壽命短,燈泡內(nèi)壓較大,如日立牌650-60型熒光分光光度計(jì),氙燈平時(shí)約有7個(gè)大氣壓,點(diǎn)燃后可達(dá)30個(gè)大氣壓,故使用進(jìn)應(yīng)注意。
1、按裝緊固螺絲時(shí)用力應(yīng)均勻,勿成扭力,以免燈泡破裂爆炸。
2、勿用手觸及燈泡,以防受熱不均破裂。
3、如燈泡有油污,應(yīng)用雞皮藮酒精輕擦,不能用布、棉花等物擦拭。
激發(fā)光源配合體視顯微鏡觀察到熒光
便攜式熒光激發(fā)光源的產(chǎn)品介紹:
美國LUYOR公司實(shí)驗(yàn)室儀器事業(yè)部致力于研究和開發(fā)熒光觀測裝備,其產(chǎn)品系列有 LUYOR-3415RG雙熒光蛋白觀測燈,LUYOR-3430、LUYOR-3260單熒光蛋白觀測手電筒。熒光是各種各樣細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)系統(tǒng)學(xué)及其他領(lǐng)域研究中的一種強(qiáng)大和廣泛使用的工具。LUYOR的LUYOR-3415RG和LUYOR-3430、LUYOR-3260除了可用于篩選轉(zhuǎn)基因生物外,還可以用于樣本的預(yù)篩選、輔助解剖、用于珊瑚研究等,下面就列舉一些實(shí)例:
LUV-20A,LUV-30A,LUV-40A,LUV-50A熒光蛋白觀察眼鏡
LUV-30A用于觀察GFP,EGFP綠色熒光蛋白發(fā)出的熒光
LUV-50A用于觀察RFP、mCherry、DsRed、Tdtomat等紅色熒光蛋白的熒光
LUV-20A用于觀察CFP、BFP藍(lán)色熒光蛋白的熒光
LUV-40A用于觀察YFP黃色熒光蛋白的熒光
1. 有時(shí)候,研究者們需要對小鼠的伏隔核進(jìn)行穿孔,以便進(jìn)一步生化分析。如果能觀測到共轉(zhuǎn)染的熒光,就能很容易找到正確的穿孔部位。研究者們就是用LUYOR-3430、LUYOR-3260單熒光蛋白觀測手電筒來觀測熒光,從而找到正確穿孔位置的。
2.研究者從小鼠大腦中提取GFP標(biāo)記的背紋體。他們把這比喻成:從一個(gè)大一點(diǎn)的燕麥片中分離出一塊小的燕麥片,這是很困難的。但是他們用的LUYOR-3415RG或LUYOR-3430、LUYOR-3260單熒光蛋白觀測手電筒(激發(fā)光和眼鏡組合),他們很容易看到大腦中的目標(biāo)區(qū)域,從而讓解剖更準(zhǔn)確。
3.用LUYOR-3415RG 雙熒光蛋白觀測燈和LUYOR-3430、LUYOR-3260單熒光蛋白觀測手電筒,可以很快的檢測樣本是否染色(Alexa Fluor 488 Phalloidin標(biāo)記)成功。
4.用于結(jié)核分枝桿菌重組株的篩選
在結(jié)核分枝桿菌中成功構(gòu)建了高效同源重組系統(tǒng),利用該系統(tǒng)構(gòu)建了rv1364c、pstP跨膜區(qū)、pstP胞外區(qū)三個(gè)突變株,得到雙交換突變株的效率為25% -62.5%,從雙交換突變株得到無痕缺失突變株的效率為100%.通過gfp作為熒光標(biāo)記基因,利用LUYOR-3421藍(lán)光激發(fā)光設(shè)備和濾光眼鏡,可以對平板上的基因缺失株直接進(jìn)行快速判定。
激發(fā)光源激發(fā)出綠色熒光時(shí),用黃色濾光鏡觀測,可檢測含綠色熒光蛋白(GFP)的生物;激發(fā)光源激發(fā)紅色熒光時(shí),用紅色濾光鏡觀測,可檢測含紅色熒光蛋白(DsRed)的生物。
LUYOR-3415RG雙熒光蛋白觀察燈的用途:
用于檢測、篩選轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白(GFP)和紅色熒光蛋白(DsRed)基因的植物、動物及微生物,如水稻、玉米、斑馬魚、小鼠、細(xì):菌、真菌等等。。。。
LUYOR-3415RG雙熒光蛋白觀察燈的產(chǎn)品優(yōu)勢:
1. 大功率輸出,無需暗室,也可輕松激發(fā)熒光。
2.檢測效率高,黑暗中檢測一目了然
3.LED壽命50000h,且系統(tǒng)穩(wěn)定,可長時(shí)間使用
4.直接檢測,而無需用底物顯色,所以安全,對被檢測對象無傷害
便攜式GFP熒光激發(fā)光源的價(jià)格:
LUYOR-3415RG雙波長熒光蛋白激發(fā)光源價(jià)格為16000元。
LUYOR-3410熒光蛋白激發(fā)光源價(jià)格為9800元。
LUYOR-3420臺式熒光蛋白激發(fā)光源價(jià)格為9800元。
美國nightsea SFA-RB臺式體視顯微鏡熒光適配器價(jià)格為19900元。
便攜式激發(fā)光源LUYOR-3415RG觀察大豆根系的GFP熒光
便攜式GFP熒光激發(fā)光源的使用方法:
經(jīng)常有客戶在上海峰志儀器有限公司買了激發(fā)光源,回去不知道怎么操作,現(xiàn)在上海峰志的技術(shù)工程師給你們講解一下操作步驟:操作前請務(wù)必給便攜式熒光蛋白激發(fā)光源LUYOR-3415RG充滿電,如果觀察GFP或EGFP熒光,請先佩戴LUV-30A熒光觀察眼鏡,打開激發(fā)光源藍(lán)色波段的開關(guān),照射轉(zhuǎn)基因表達(dá)的物體,如果有表達(dá),會觀察到綠色熒光;如果觀察RFP、dsred、mcherry、tdtomato等紅色熒光蛋白的熒光,請先佩戴LUV-50A紅色熒光觀察眼鏡,打開激發(fā)光源綠色波段的開關(guān),照射轉(zhuǎn)基因表達(dá)的物體,如果有表達(dá),會觀察到紅色熒光;如果通過熒光顯微鏡能夠觀察到熒光,而便攜式激發(fā)光源缺觀察不到熒光,這主要是因?yàn)檩d體表達(dá)量太低,人的眼睛識別不到微弱的熒光信號,下次實(shí)驗(yàn)更換高表達(dá)的載體就行。
上海峰志儀器有限公司銷售各種激發(fā)光源,。
推薦瀏覽更多熒光蛋白表達(dá)的效果圖:(熒光蛋白表達(dá)的案例展示