用什么熒光燈可以看GFP綠色熒光蛋白?

用什么熒光燈可以看GFP綠色熒光蛋白?

LUYOR-3415RG便攜式雙波長(zhǎng)熒光燈可與熒光蛋白觀察眼鏡luv-30A或 luv-50A一起使用直接觀察綠色熒光蛋白（GFP）或紅色熒光蛋白（RFP）。激發(fā)光源與觀察眼鏡LUV-30A共同使用，可在動(dòng)物設(shè)備的固定位置如層流柜直接觀察綠色熒光蛋白（GFP）。LUYOR-3415RG激發(fā)光源使用鋰電池組供電，可與觀察鏡luv-30A 或 luv-50A一起使用直接觀察綠色熒光蛋白（GFP）或黃色熒光蛋白（YFP）。

綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，GFP)

 綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，GFP)是一類存在于腔腸動(dòng)物體內(nèi)的生物發(fā)光蛋白。GFP具有多種優(yōu)點(diǎn)：易于檢測(cè)，靈敏度高；熒光性質(zhì)穩(wěn)定，耐受性強(qiáng)；易于表達(dá)，無細(xì)胞毒性；可用于活細(xì)胞檢測(cè)。因此，GFP可作為報(bào)告基因用于檢測(cè)基因表達(dá)或調(diào)控，或作為融合標(biāo)簽來檢測(cè)蛋白質(zhì)分子的定位、遷移、構(gòu)象變化以及分子間的相互作用，或者靶向標(biāo)記某些細(xì)胞器。

GFP吸收的光譜峰值為395nm（紫外），并有一個(gè)峰值為470nm的副吸收峰（藍(lán)光）；發(fā)射光譜峰值為509nm（綠光），并帶有峰值為540nm的側(cè)峰（Shouder）。雖然450～490nm只是GFP的副吸收峰，但由于該激發(fā)光對(duì)細(xì)胞的傷害更小，因此通常多使用該波段光源（多為488nm）。此外，GFP的光譜特性與熒光素異硫氰酸鹽（FITC）很相似，兩者通常共有一套濾光片。GFP熒光極其穩(wěn)定，在激發(fā)光照射下，GFP抗光漂白（Photobleaching）能力比熒光素強(qiáng)，特別是在450～490nm藍(lán)光波長(zhǎng)下更穩(wěn)定。

類似的，GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠(yuǎn)比熒光素標(biāo)記的熒光抗體高，抗光漂白能力強(qiáng)，因此更適用于定量測(cè)定與分析。由于GFP熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應(yīng)底物，因此GFP作為一種廣泛應(yīng)用的活體報(bào)告蛋白，其作用是任何其它酶類報(bào)告蛋白無法比擬的。但因?yàn)镚FP不是酶，熒光信號(hào)沒有酶學(xué)放大效果，因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報(bào)告蛋白，比如螢火蟲熒光素酶等。

觀察GFP熒光蛋白方法有：

1.便攜式GFP激發(fā)光源：

采用便攜式GFP激發(fā)光源(又叫熒光蛋白觀測(cè)鏡）是zui便捷、zui方便的觀察方法，因GFP在470nm有一個(gè)很高的吸收峰，采用  470nm激發(fā)光源能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮的綠色熒光，在觀察gfp熒光時(shí)，因?yàn)榧ぐl(fā)光為強(qiáng)烈的藍(lán)色光線，必須佩戴專業(yè)的觀察眼鏡才能觀察到清晰的熒光信號(hào)。推薦使用美國(guó)路陽LUYOR-3415或LUYOR-3410便攜式激發(fā)光源。

上圖為采用便攜式GFP激發(fā)光源觀察到的效果

2. 紫外光源（紫外熒光燈）：

采用紫外光源（又叫紫外線燈、黑光燈）觀察也非常方便，但如果觀察植物，植物葉片的葉綠色在紫外線燈下也會(huì)發(fā)出熒光，對(duì)gfp發(fā)出的熒光也會(huì)產(chǎn)生干擾，另外，標(biāo)本長(zhǎng)時(shí)間在紫外光源照射下對(duì)GFP標(biāo)本組織也會(huì)造成破壞。

LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源可野外、實(shí)驗(yàn)室原位測(cè)定GFP(綠色熒光蛋白)。通過定點(diǎn)觀察GFP，可有利于學(xué)習(xí)如何操縱和提高有用的染色體特性，從而可以篩選出高基因表達(dá)的植物。

LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源的應(yīng)用：

1、 野外、實(shí)驗(yàn)室原位測(cè)定GFP(綠色熒光蛋白)。

2、 應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因作物研究。

3、 區(qū)別可遺傳性改良生物體和不可遺傳的改良生物體。

4、 用于基因表達(dá)的研究。

5、 用于Rhodamine（紅色熒光染料）、葉綠素、熒光素的研究。